DPPIV-Glo™ 蛋白酶检测试剂盒系统提供了DPPIV 底物,该底物为发光前体,Gly-Pro- 氨基萤光素,上述物质存在于经过优化的缓冲系统中,可确保DPPIV 和萤光素酶发挥活性。加入单溶液的DPPIV-Glo™ 试剂,只需" 加样- 混合- 检测" 个步骤,DPPIV 即作用于底物,并通过萤光素酶反应产生" 辉光型" 发光信号。在这种均质的双酶偶联的反应中,该发光信号的强弱与DPPIV 酶的活力成正比。该试剂盒专为检测纯化的酶制剂而设计。
特点 - 优点
. 简化的方法:均质的" 加样- 混合- 检测" 三个简单步骤使其更适于自动化操作。
• 更高的灵敏度:该方法比普通基于化学荧光的DPPIV 检测法灵敏度更高,与化学荧光检测法相比,发光检测法避免了固有的背景荧光信号的干扰。使信号背景比更好。这种检测方法的线性范围超过了DPPIV 浓度的三个数量级,可以检测到少于1pg/ml的酶量。
• 更快地得到结果:信号只需在试剂加入30分钟后即可达到最强( 和最高灵敏度),与化学荧光反应不同,发光信号不依赖于蛋白剪切产物的积累。
• 可以进行批处理:信号的稳定性使得检测板在较长时间后仍可进行检测。
应用
DPPIV 酶活性测定。
DPPIV抑制剂的动力学研究。
注意事项
Cat.# G8350能够在96孔板内完成100次实验,每次最终用量为100μl或200次实验,每次用量为50μl;在384孔板内完成400次实验,每次最终用量为25μl。Cat.# G8351能够在96孔板内完成500次实验,每次最终用量为100μl或1000次实验,每次用量为50μl;;在384孔板内完成2000次实验,每次最终用量为25μl。
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Figure 1. The proluminescent substrate containing the Gly-Pro sequence recognized by DPPIV.
Following DPPIV cleavage, the substrate for luciferase (aminoluciferin) is released, resulting in the luciferase reaction and the production of light.
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Figure 2. Overview of the preparation and use of the DPPIV-Glo™ Reagent.
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