DNA Polymerase I M2051(500μ)、M2055(2500μ)
DNA Polymerase I(DNA 聚合酶 I)催化以模板引导的方式将核苷酸按 5'→ 3' 的方向掺入到双链 DNA 的聚合反应。DNA Polymerase I 具有 3'→ 5' 外切酶活性或“纠错”功能, 降低了 DNA 复制过程中的错误率。它还具有 5'→ 3' 外切酶活性,使它能够通过缺口翻译替换正在合成的 DNA 中的核苷酸。该酶从重组 E.coli 中纯化,能够催化重新合成同质多聚体并提供了制备各种性质明确的 DNA 底物的方便方法。
特点 - 优点
• 灵活性:DNA Polymerase I 可用于多种分子生物学实验。
• 高温灭活:DNA Polymerase I 在 68℃ 加热 10 分钟失活。
• 提供 10× 反应缓冲液:500mM Tris-HCl(pH 7.2,25℃),100mM MgSO4,1mM DTT。
应用
• 通过缺口平移标记 DNA 使其具备高度特异的放射活性
• 第二链cDNA合成
存储缓冲液
50mM Tris-HCl (pH 7.5 at 25°C), 1mM DTT, 0.1mM EDTA, 50% (v/v) glycerol.
储存条件
储存于-20℃。
单位定义
One unit is defined as the amount of enzyme that incorporates 10nmol of deoxyribonucleotides into TCA-insoluble material in 30 minutes at 37°C. The reaction conditions are: 67mM potassium phosphate (pH 7.4 at 25°C), 6.7mM MgCl2, 1mM DTT, 50μg/ml activated calf thymus DNA and 33μM dATP, dCTP, dGTP and dTTP (a mix of unlabeled and [3H]dTTP).