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HaloTag® Fluorescent Ligands
产品名称:

HaloTag® Fluorescent Ligands

上市日期: 2017-01-20

HaloTag® Fluorescent Ligand(HaloTag®荧光配基)具有多种功能,包括荧光标记、亲和标签和连接至固相载体。在生理条件下,HaloTag®蛋白与配基间的共价结合十分迅速,高度特异且不可逆。研究者可以将氯代烷基团(与HaloTag®蛋白共价结合的基团)连接至任一具有相容化学基团的化合物或载体表面,创造无限可能的应用。

产品概述

HaloTag® TMR Ligand 30μl 5mM G8251

HaloTag® TMR Ligand 15μl 5mM G8252

HaloTag® Oregon Green® Ligand 30μl 1mM G2801

HaloTag® Oregon Green® Ligand 15μl 1mM G2802

HaloTag® diAcFAM Ligand 30μl 1mM G8272

HaloTag® diAcFAM Ligand 15μl 1mM G8273

HaloTag® Coumarin Ligand 30μl 10mM G8581

HaloTag® Coumarin Ligand 15μl 10mM G8582

HaloTag® Alexa Fluor® 488 Ligand 30μl 1mM G1001

HaloTag® Alexa Fluor® 488 Ligand 15μl 1mM G1002

HaloTag® Alexa Fluor® 660 Ligand 30μl 3.5mM G8471

HaloTag® Alexa Fluor® 660 Ligand 15μl 3.5mM G8472

HaloTag® TMRDirect™ Ligand 30μl 0.1mM G2991

HaloTag® R110Direct™ Ligand 30μl 0.1mM G3221

HaloTag® Biotin Ligand 30μl 5mM G8281

HaloTag® Biotin Ligand 15μl 5mM G8282

HaloTag® PEG-Biotin Ligand 30μl 5mM G8591

HaloTag® PEG-Biotin Ligand 15μl 5mM G8592


用于细胞成像的HaloTag® Fluorescent Ligand

可透过细胞膜的荧光配基(快速标记步骤):

  • HaloTag® TMR Ligand (555Ex/585Em)

  • HaloTag® Oregon Green® Ligand (496Ex/516Em)

  • HaloTag® diAcFAM Ligand (494Ex/526Em)

  • HaloTag® Coumarin Ligand (353Ex/434Em)

     

用于细胞表面标记的不能透过细胞膜的荧光配基(快速标记步骤):

  • HaloTag® Alexa Fluor® 488 Ligand (494Ex/517Em)

  • HaloTag® Alexa Fluor® 660 Ligand (663Ex/690Em)

可透过细胞膜的荧光配基(“无漂洗”步骤):

  • HaloTag® TMRDirect™ Ligand (555Ex/585Em)

  • HaloTag® R110Direct™ Ligand (502Ex/527Em)

Alexa Fluor® 488 Ligand不能穿透细胞膜,用于标记细胞表面蛋白。TMR Ligand, Oregon Green® Ligand, diAcFAM Ligand 和Coumarin Ligand容易透过细胞膜,用于标记细胞内蛋白。

用于蛋白检测的HaloTag® Ligand:
HaloTag® Biotin Ligand是由一段12个原子的反应接头(reactive linker)连接到生物素分子上构成的,用作捕获HaloTag®融合蛋白的亲和标签。此配基依靠生物素-链霉亲和素之间强劲的相互作用实现蛋白捕获。

HaloTag® PEG-Biotin Ligand包含一段HaloTag® Biotin Ligand里没有的间隔臂(spacer)。这个间隔臂显著延长了链霉亲和素与HaloTag®蛋白之间接头的长度,并增加了接头的柔韧度,利于在固相化或衍生化过程中保持与HaloTag®蛋白融合的目的蛋白的活性。

特点 - 优点

  • 支持液相或固相载体标记:HaloTag®配基与HaloTag®蛋白或融合蛋白的结合具有高度的特异性和亲和性。

  • 活细胞内标记HaloTag®蛋白:HaloTag® TMR、diAcFAM、 Coumarin 和Biotin Ligand容易穿透细胞膜。

  • Pull Down蛋白复合体:HaloTag® PEG-Biotin Ligand的间隔臂和反应接头提供了理想的pull-down性能。也可使用HaloLink™ Resin直接pull down。

  • 固定细胞也可成像:HaloTag®蛋白与配基间的共价键十分稳定,可以对固定的细胞成像,允许在严苛的条件下分析标记的蛋白。

  • 引入新的功能或实现顺序标记:开放的技术架构允许使用不同的配基进行多重应用。

  • 在多重实验中只需设计一个基因表达载体:使用不同的HaloTag® Ligand即可获得新的的功能而无需设计新的表达克隆。

  • 可以使用SDS-PAGE和质谱等技术分析标记的融合蛋白:共价结合的配基在变性条件下仍然稳定。

应用

  • 蛋白定位

  • 蛋白转运

  • 蛋白捕获

  • Cell-to-gel分析

  • 蛋白相互作用(protein:protein interaction, PPI)分析

HaloTag® Fluorescent Ligands

Figure 1. Structure of the HaloTag® Ligands showing the functional reporters and the reactive linker.

All HaloTag® Ligands have the same chloroalkane reactive linker. The ligands differ in the functional reporter and in the distance of the reporter from the linker. HaloTag® Alexa Fluor® 488 Ligand structure reprinted with permission of Molecular Probes. HaloTag® Alexa Fluor® 660 Ligand structure not available.


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