HaloTag® TMR Ligand 30μl 5mM G8251
HaloTag® TMR Ligand 15μl 5mM G8252
HaloTag® Oregon Green® Ligand 30μl 1mM G2801
HaloTag® Oregon Green® Ligand 15μl 1mM G2802
HaloTag® diAcFAM Ligand 30μl 1mM G8272
HaloTag® diAcFAM Ligand 15μl 1mM G8273
HaloTag® Coumarin Ligand 30μl 10mM G8581
HaloTag® Coumarin Ligand 15μl 10mM G8582
HaloTag® Alexa Fluor® 488 Ligand 30μl 1mM G1001
HaloTag® Alexa Fluor® 488 Ligand 15μl 1mM G1002
HaloTag® Alexa Fluor® 660 Ligand 30μl 3.5mM G8471
HaloTag® Alexa Fluor® 660 Ligand 15μl 3.5mM G8472
HaloTag® TMRDirect™ Ligand 30μl 0.1mM G2991
HaloTag® R110Direct™ Ligand 30μl 0.1mM G3221
HaloTag® Biotin Ligand 30μl 5mM G8281
HaloTag® Biotin Ligand 15μl 5mM G8282
HaloTag® PEG-Biotin Ligand 30μl 5mM G8591
HaloTag® PEG-Biotin Ligand 15μl 5mM G8592
用于细胞成像的HaloTag® Fluorescent Ligand
可透过细胞膜的荧光配基(快速标记步骤):
HaloTag® TMR Ligand (555Ex/585Em)
HaloTag® Oregon Green® Ligand (496Ex/516Em)
HaloTag® diAcFAM Ligand (494Ex/526Em)
HaloTag® Coumarin Ligand (353Ex/434Em)
用于细胞表面标记的不能透过细胞膜的荧光配基(快速标记步骤):
可透过细胞膜的荧光配基(“无漂洗”步骤):
Alexa Fluor® 488 Ligand不能穿透细胞膜,用于标记细胞表面蛋白。TMR Ligand, Oregon Green® Ligand, diAcFAM Ligand 和Coumarin Ligand容易透过细胞膜,用于标记细胞内蛋白。
用于蛋白检测的HaloTag® Ligand:
HaloTag® Biotin Ligand是由一段12个原子的反应接头(reactive linker)连接到生物素分子上构成的,用作捕获HaloTag®融合蛋白的亲和标签。此配基依靠生物素-链霉亲和素之间强劲的相互作用实现蛋白捕获。
HaloTag® PEG-Biotin Ligand包含一段HaloTag® Biotin Ligand里没有的间隔臂(spacer)。这个间隔臂显著延长了链霉亲和素与HaloTag®蛋白之间接头的长度,并增加了接头的柔韧度,利于在固相化或衍生化过程中保持与HaloTag®蛋白融合的目的蛋白的活性。
特点 - 优点
支持液相或固相载体标记:HaloTag®配基与HaloTag®蛋白或融合蛋白的结合具有高度的特异性和亲和性。
活细胞内标记HaloTag®蛋白:HaloTag® TMR、diAcFAM、 Coumarin 和Biotin Ligand容易穿透细胞膜。
Pull Down蛋白复合体:HaloTag® PEG-Biotin Ligand的间隔臂和反应接头提供了理想的pull-down性能。也可使用HaloLink™ Resin直接pull down。
固定细胞也可成像:HaloTag®蛋白与配基间的共价键十分稳定,可以对固定的细胞成像,允许在严苛的条件下分析标记的蛋白。
引入新的功能或实现顺序标记:开放的技术架构允许使用不同的配基进行多重应用。
在多重实验中只需设计一个基因表达载体:使用不同的HaloTag® Ligand即可获得新的的功能而无需设计新的表达克隆。
可以使用SDS-PAGE和质谱等技术分析标记的融合蛋白:共价结合的配基在变性条件下仍然稳定。
应用
Figure 1. Structure of the HaloTag® Ligands showing the functional reporters and the reactive linker.
All HaloTag® Ligands have the same chloroalkane reactive linker. The ligands differ in the functional reporter and in the distance of the reporter from the linker. HaloTag® Alexa Fluor® 488 Ligand structure reprinted with permission of Molecular Probes. HaloTag® Alexa Fluor® 660 Ligand structure not available.