Tth DNA 聚合酶在镁离子存在的条件下可催化核苷酸沿5` → 3`方向发生聚合反应,形成双链DNA,也可在锰离子存在的条件下,以RNA为模板沿 5` → 3` 方向发生核苷酸聚合反应。该酶也具有5` → 3`外切酶活性。Tth DNA 聚合酶可用于PCR、RT-PCR、逆转录和较高温度条件下的引物延伸反应。
10X Reverse Transcription Buffer:100mM Tris-HCl (pH 8.3,25℃ ), 900mM KCl。
10X Chelate Buffer:100mM Tris-HCl (pH 8.3,25℃ ), 1M KCl,7.5mM EGTA, 0.5% Tween® 20, 50% 甘油。
Thermophilic DNA Polymerase 10X Reaction Buffer:500mM KCl, 100mM Tris-HCl (pH 9.0,25℃ ) 和1% Triton® X-100。缓冲液经过优化合与0.2mM 的dNTP 一起使用。
氯化锰和氯化镁:提供10mM MnCl2 和25mM MgCl2 溶液。
特点 - 优点
. RT-PCR 反应的特异性增加:在较高的温度下进行逆转录,增加了引物杂交和延伸的特异性。
. 减少二级结构相关问题:较高的温度下进行逆转录,减少了由于RNA 二级结构引起的问题。
. 品质保证:Promega 公司的PCR 系统、酶和试剂被证明在PCR中能得到可靠高效的结果。
应用
• RT-PCR;
• PCR;
• 引物延伸;
• 逆转录;
储存条件
储存于–20°C。