该酶反应需Mg2+参与,以双链DNA为模板催化核苷酸从5’向3’末端形成双链DNA。该酶同时具有5’ 3’ 核酸外切酶的活性,主要用于DNA的PCR扩增、DNA测序,可以很好地扩增1kb以下的DNA片段。
在74℃条件下,30分钟内,能够吸收10nmmol dNTP,形成酸性不溶性物质所需的酶量为1u。
50%甘油,20mM Tris-HCl(pH8.0),100mM KCl,0.1mM EDTA,1mM DTT,0.5% Tween® 20和0.5% NP-40。
10X反应缓冲液(含MgCl2):包含15mM MgCl2、500mM KCl、100mM Tris-HCl(pH9.0,25℃)、1%Triton® X-100。建议该缓冲液加入每种dNTP的最适宜浓度为0.2mM。注:反复冻融可能引起氯化镁沉淀,将缓冲液加热并充分振荡恢复溶液的均一性。
长期储存(非频繁使用:每月1-2次):-70℃保存;每天或每周使用:-20℃保存。
避免多次冻融,切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的温东兴有较大影响。