psiCHECK™-1 Vector 20μg C8011
psiCHECK™-2 Vector 20μg C8021
两种载体都应用海肾萤光素酶作为主要报告基因，目的基因被克隆至海肾萤光素酶翻译终止密码子下游的多克隆位点。由合成的 siRNA 或体内表达的 shRNA 引发的针对目的基因的 RNAi过程，导致融合 mRNA 的剪切和随后的降解。检测海肾萤光素酶活性的降低是一种监测 RNAi 效果的简便方法。与其它的融合蛋白检测法（如 GFP 或 flag 标签）相比，海肾萤光素酶方法灵敏度更高、更方便、定量更快速。推荐 psiCHECK™ -1 载体用于检测活细胞中的 RNAi 效果。使用 EnduRen™ 活细胞底物（Cat.# E6481）检测海肾萤光素酶活性变化，这种底物可持续监测细胞内的海肾萤光素酶的发光。psiCHECK™ -2 载体含有第二个报告基因——萤火虫萤光素酶，被设计用于终点裂解检测。其作用是使海肾萤光素酶表达归一化，可以得到强劲且可重复的数据。
特点 - 优点
• 节省花费：使用普通的发光检测仪定量即可；无需购买昂贵的仪器。
• 有不同模式：可选择进行活细胞或细胞裂解物检测操作。
• 节约时间：无需费力费时的检测或等待表型的改变。
• 便利：使用 psiCHECK™-2 载体无需对转染进行归一化。
应用
• RNAi 靶标研究
Figure 1. Mechanism of action of the psiCHECK™ Vectors.
Figure 2. psiCHECK™-1 Vector.
Figure 3. psiCHECK™-2 Vector.