这一载体是基于 Promega 的双报告基因技术,萤火虫萤光素酶基因(luc2)作为主报告基因,用于监控 mRNA 的调节,海肾萤光素酶基因(hRluc-neo)作为对照报告基因,用于进行归一化处理和阳性筛选。
特点 - 优点
• 检测 miRNA 功能:报告基因的活性与 miRNA 的活性相关。
• 优化的报告基因:luc2 萤光素酶基因表达最高。
• 联合海肾/ 新霉素标记:可与 Dual-Luciferase® 检测试剂盒进行归一化处理,或筛选稳定转染的细胞系;两个功能仅需一个载体即可实现。
• 生物学相关结果:中等强度的 PGK 启动子能够进行敏感度高的分析,而强启动子是无法实现的。
应用
• miRNA 检测
• miRNA 结合位点分析
• 转录稳定性研究
• 3'-UTR 分析
Figure 1. pmirGLO Vector.
Figure 2. Mechanism of action of the pmirGLO Vector.
Figure 3. Normalized luciferase activity using the pmirGLO Vector with an mi-R21 target sequence.