β- 半乳糖苷酶是一种很好的报告基因酶,可以用分光光度法、荧光法或化学发光法快速直接地在细胞提取物中检测。使用 X-Gal 作底物,这个报告基因酶也被广泛用于原位组化分析。
pSV-β- 半乳糖苷酶对照载体可与您的目的 DNA 共转染。例如,如果将该载体与萤火虫萤光素酶基因载体(pGL3 载体)进行共转染,能够同时检测细胞提取物中的萤光素酶和 β- 半乳糖苷酶的活性。在这种情况下,pSV-β- 半乳糖苷酶载体作为瞬时表达检测的内对照。实验也应检测阴性对照提取物,用于判定细胞培养物中有无内源性 β- 半乳糖苷酶,该阴性对照提取物由假转染的细胞制备而来。此外,共转染氯霉素乙酰转移酶报告基因载体(pCAT® 3 载体),就能够检测 CAT 和 β- 半乳糖苷酶的活性。pSV-β- 半乳糖苷酶载体是由 pRSV-β-Gal 改造而来,将 SV40 和 pUC18 序列取代了 RSV 和 pBR322 序列。pSV-β- 半乳糖苷酶载体可在 E.coli 内表达 pSV-β- 半乳糖苷酶,因为 lac Z 基因的上游为 E.coli gpt 启动子。带有 pSV-β-半乳糖苷酶载体的 E.coli 克隆在含有 X-Gal 的培养基上呈蓝色。