研究者只需准备含有合适的原核启动子和核糖体结合位点的克隆 DNA 即可。这种提取物的制备采用并改进了 Zubay 描述的方法,是从 OmpT 内蛋白酶和 lon蛋白酶活性缺失的大肠杆菌 B 株制得。从而极大地增强了表达蛋白的稳定性,因为若在体内翻译的话,表达的目标蛋白将会被蛋白酶降解。由于宿主编码的抑制物的存在,某些蛋白在体内表达的水平很低,使用 S30 体外系统可提高这些蛋白的翻译水平。
特点 - 优点
• 更好的稳定性:降低了表达蛋白被降解的机会。
• 完备:包含了偶联的转录/ 翻译反应需要的所有组分。
• 低背景:系统合成的内源蛋白质水平极低。
• 经过优化:每批 S30 提取物的预混合物已经经过优化,包括所有其它必需组分(氨基酸除外),如核糖体、各种tRNAs、PEP(磷酸烯醇丙酮酸)和盐类。
• 可定制或批量订购:详情请联系普洛麦格(北京)生物技术有限公司。
应用
• 调控原核基因表达
• 鉴定克隆的 DNA 基因产物或明确的 DNA 片段的多肽谱
• 快速筛选克隆到专门用于在 E.coli 中高表达载体的真核或原核 DNAs 的翻译
• 筛选抑制细菌翻译的化合物