DPPIV-Glo™ 蛋白酶检测试剂盒系统提供了DPPIV 底物,该底物为发光前体,Gly-Pro- 氨基萤光素,上述物质存在于经过优化的缓冲系统中,可确保DPPIV 和萤光素酶发挥活性。加入单溶液的DPPIV-Glo™ 试剂,只需" 加样- 混合- 检测" 个步骤,DPPIV 即作用于底物,并通过萤光素酶反应产生" 辉光型" 发光信号。在这种均质的双酶偶联的反应中,该发光信号的强弱与DPPIV 酶的活力成正比。该试剂盒专为检测纯化的酶制剂而设计。
特点 - 优点
. 简化的方法:均质的" 加样- 混合- 检测" 三个简单步骤使其更适于自动化操作。
• 更高的灵敏度:该方法比普通基于化学荧光的DPPIV 检测法灵敏度更高,与化学荧光检测法相比,发光检测法避免了固有的背景荧光信号的干扰。使信号背景比更好。这种检测方法的线性范围超过了DPPIV 浓度的三个数量级,可以检测到少于1pg/ml的酶量。
• 更快地得到结果:信号只需在试剂加入30分钟后即可达到最强( 和最高灵敏度),与化学荧光反应不同,发光信号不依赖于蛋白剪切产物的积累。
• 可以进行批处理:信号的稳定性使得检测板在较长时间后仍可进行检测。
应用
DPPIV 酶活性测定。
DPPIV抑制剂的动力学研究。
注意事项
Cat.# G8350能够在96孔板内完成100次实验,每次最终用量为100μl或200次实验,每次用量为50μl;在384孔板内完成400次实验,每次最终用量为25μl。Cat.# G8351能够在96孔板内完成500次实验,每次最终用量为100μl或1000次实验,每次用量为50μl;;在384孔板内完成2000次实验,每次最终用量为25μl。
Figure 1. The proluminescent substrate containing the Gly-Pro sequence recognized by DPPIV.
Following DPPIV cleavage, the substrate for luciferase (aminoluciferin) is released, resulting in the luciferase reaction and the production of light.
Figure 2. Overview of the preparation and use of the DPPIV-Glo™ Reagent.