PH6HTN His6HaloTag® T7 Vector 20μg G7971
pH6HTC His6HaloTag® T7 Vector 20μg G8031
pF1A T7 Flexi® Vector 20μg C8441
pF1K T7 Flexi® Vector 20μg C8451
pFN18A HaloTag® T7 Flexi® Vector 20μg G2751
pFN18K HaloTag® T7 Flexi® Vector 20μg G2681
pFN19A HaloTag® T7 SP6 Flexi® Vector 20μg G1891
pFN19K HaloTag® T7 SP6 Flexi® Vector 20μg G1841
pFC20A HaloTag® T7 SP6 Flexi® Vector 20μg G1681
pFC20K HaloTag® T7 SP6 Flexi® Vector 20μg G1691
pFN29A His6HaloTag® T7 Flexi® Vector 20μg G8261
pFN29K His6HaloTag® T7 Flexi® Vector 20μg G8331
pFC30A His6HaloTag® T7 Flexi® Vector 20μg G8321
pFC30K His6HaloTag® T7 Flexi® Vector 20μg G8381
Flexi® 载体系统是一种简单的蛋白编码序列的定向克隆方法。该方法建立在两种位点稀有的限制性酶 Sgfl 和 Pmel 基础上,可以将蛋白编码区在不同的Flexi® 载体之间转换,而不需要重新测序,该方法快速、有效、保真度高。只有两个 N- 末端标记的载体或者从 N- 末端到 C- 末端的载体可以发生直接转化,多克隆位点载体和几个 Flexi® 系统载体一个 His6-HaloTag® 双重标签。这种双标签能够使用重复利用的镍树脂进行蛋白质纯化,保留了 HaloTag® 共价标记属性。
多克隆位点载体
pH6HTN His6HaloTag® T7 Vector(Cat.#G7971)用于大肠杆菌和 T7 无细胞表达系统中具有 N- 末端 His6-HaloTag® 双标签蛋白的表达。
pH6HTC His6HaloTag® T7 Vector(Cat.# G8031)用于大肠杆菌和 T7 无细胞表达系统中具有 C- 末端 His6-HaloTag® 双标签蛋白的表达。
Flexi® 系统载体
pF1A/K T7 Flexi® Vectors(Cat.# C8441,C8451)用于无标签蛋白的表达。
pFN18A/KHaloTag® T7 Flexi® Vectors(Cat.# G2751,G2681)用于大肠杆菌和 T7 无细胞表达系统中具有 N- 末端 HaloTag® 蛋白的表达。
pFN19A/KHaloTag® T7 SP6 Flexi® Vectors(Cat.# G1891,G1841)用于大肠杆菌和 T7 SP6 无细胞表达系统中具有 N- 末端 HaloTag® 蛋白的表达。这些载体经优化适用于无细胞表达系统。
pFC20A/KHaloTag® T7 SP6 Flexi® Vectors(Cat.# G1681,G1691)用于大肠杆菌和 SP6 无细胞表达系统中具有 C- 末端 HaloTag® 蛋白的表达。
这些载体经优化适用于无细胞表达系统。
pFN29A/K His6HaloTag® T7 Flexi® Vectors(Cat.# G8261,G8331)用于大肠杆菌T7 无细胞表达系统中具有 N- 末端 His6-HaloTag® 双标签蛋白的表达。
pFC30A/K His6HaloTag® T7 Flexi® Vectors(Cat.# G8321,G8381)用于大肠杆菌T7 无细胞表达系统中具有 C- 末端 His6-HaloTag® 双标签蛋白的表达。
注意:Flexi® 载体带有致死性 barnase 基因,可以减少载体构建过程中不带有插入片段的阴性克隆的产生。barnase 基因可被插入的目的 DNA 片段所替代。所购买的这一类载体在没有插入目的 DNA 片段的情况下,带有空载体的常用实验室大肠杆菌菌株不能生长。
特点 - 优点
• 系统可选:选择传统(MCS)和 Flexi® 克隆体验 HaloTag® 技术带来的好处。
• 双标签:兼顾蛋白溶解性和 HaloTag® 技术作为标记的优势,并可再利用和应用镍亲和技术纯化。
• 通用克隆:您可以随意选择各种表达系统和融合标签的方向,然后可以根据需要转向其它其他载体(对于 Flexi® 系统)。
• 省时:芽孢杆菌 RNA 酶插入(Flexi® 系统)减少了背景克隆的数量,克隆片段可以有效地转移。
应用
• 使用 HaloTag® 技术进行细菌蛋白的表达和纯化
• 使用 HaloTag® 技术进行无细胞蛋白表达和纯化
• His6 介导纯化用于共价标记 HaloTag® 配体的融合蛋白