RNasin® Plus RNase Inhibitor N2611(2500μ)、 N2615(10000μ)
RNasin® Plus RNase Inhibitor也能和TaqMan®定量、实时RT-PCR兼容。与人源的这种蛋白相比,RNasin® Plus RNase Inhibitor具有更高的抗氧化活性。研究表明来源于人的该蛋白的两个半胱氨酸对氧化非常敏感,并形成二硫键封闭了抑制剂的活性位点。利用天然氨基酸的多样性,RNasin® Plus RNase Inhibitor不会形成封闭活性位点的二硫键。此外,还发现这种重组蛋白具有以前从未认识的特性,即在50°C以上能持续抑制RNase。将RNasin® Plus RNase Inhibitor和RNase的溶液加热再冷却,不会造成RNase活性的恢复——即使溶液温度超过RNasin® Plus蛋白的变性温度。因此,RNasin® Plus RNase Inhibitor能够在加热前、加热中及加热后保护RNA,即使在RT-PCR中第一链DNA合成温度下亦如此。溶液加热至70°C,15分钟,没有观察到RNase的活性恢复。
特点 - 优点
广谱的RNase抑制剂:抑制常见真核生物的RNase。
可与多种酶共同使用:不会抑制SP6、T7、T3 RNA Polymerase;GoScript™ Reverse Transcriptase、AMV或M-MLV Reverse Transcriptase;以及Taq DNA polymerase的活性。
用于多种下游试验:PH范围宽(PH5-8)。
天然和重组两种形式可选:重组形式的RNase抑制剂来源于细菌,减少了人类核酸的污染。
RNasin® Plus RNase Inhibitor also can:
增强的抗氧化能力:借助于天然氨基酸的多样性,RNasin® Plus RNase Inhibitor不能形成人源蛋白在氧化条件下会形成的封闭活性位点的二硫键。
高纯度:RNasin® Plus RNase Inhibitor是E. coli表达的可溶蛋白,利用离子交换和疏水层析相结合的方法很容易纯化获得。不需要直接亲和层析。这种方法可产生纯度>90%的抑制剂蛋白,无E. coli RNase残留。
与RT-PCR系统兼容:已经证明RNasin® Plus RNase Inhibitor可与Access和Access QuickTM RT-PCR System、M-MLV Reverse Transcriptase、ImProm-IITMReverse Transcription System和GoScript™ Reverse Transcription System兼容。同样也与基于TaqMan®的RT-PCR systems兼容。
在RNA模板变性过程中保护RNA:即使在70°C加热RNasin® Plus RNase Inhibitor和RNase的混合物15分钟,也不会导致RNA酶的活性复苏。许多RT-PCR操作方法需要在RT 反应前将RNA模板在RT引物存在时变性(例如65-70°C, 5-10分钟)以获得最大灵敏度。现在您可以在这一步骤中使用RNasin® Plus RNase Inhibitor。
可保护较高温度下的RT反应:使用ImProm-IITM和AMV Reverse Transcriptase等进行RT反应时,可加入RNasin® Plus RNase Inhibitor,在50°C以上进行反应。可能存在的RNase在高温下会失活。
应用