cAMP-Glo™ Assay 可在 96 孔、384 孔和 1536 孔培养板中进行。用一种测试化合物在一段合适的时间内诱导细胞;诱导后裂解细胞,释放cAMP,接着加入含有蛋白激酶 A 的 cAMP 检测溶液。然后加入 Kinase-Glo® Reagent 终止 PKA 反应,并用萤光素酶反应检测残余 ATP。培养板放置于微孔板发光检测仪中读取数据。利用 cAMP 标准曲线,发光值和 cAMP 的浓度相关联。发光信号的半衰期超过 4 小时。信号半衰期的延长使实验用的发光检测仪不再需要带有进样器,可以直接进行多个微孔板的批量处理。
特点 - 优点
• 快速、易用:
- 检测可在大约 45 分钟内完成。
- 均质。
- 裂解细胞后只需两步。
• 信噪比优良:
- 在所有的检测 cAMP 的试剂盒中,信号/ 背景的比率最高。
- 信号/ 背景的比率 >200(cAMP),>15(细胞)。
- 体系易于调整为 1536 孔板和更多孔培养板。
• 行之有效的发光技术:
- Ultra-Glo™ 重组萤光素酶驱动。
- 无荧光化合物的干扰。
- 无放射性。
应用
• 对文库化合物进行高通量筛选,鉴定 GPCR 活性调节物
注意事项
Cat.# V1501 能够在 384 孔板内完成 300 次实验,每次最终用量为 60μl。Cat.# V1502 能够在 384 孔板内完成 3,000 次实验,每次最终用量为 60μl。
Cat.# V1503 能够在 384 孔板内完成 30,000 次实验,每次最终用量为 60μl。