PD-1是表达在活化的T细胞和B细胞表面的免疫抑制性受体,在调节肿瘤抗原和自身免疫抗原应答过程中发挥重要作用。PD-1通过表达在相邻细胞的配体PD-L1或PD-L2,抑制TCR信号通路和TCR-介导的细胞增殖以及细胞因子的产生。用于抑制PD-1/PD-L1相互作用的治疗性抗体和Fc融合蛋白,在针对多种癌症治疗的临床试验中表现出了值得期待的效果。
PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay是一种具有生物相关性,可以反应作用机制(Mechanism of Action)的细胞学检测方法,专门用于检测阻断PD-1/PD-L1相互作用的抗体或其他生物大分子的药效和稳定性。该方法的核心组成部分包括2种经过基因工程改造的细胞系:
PD-1/PD-L1 Effector Cells:Jurkat T细胞稳定表达人PD-1和NFAT-诱导的萤光素酶
PD-L1 aAPC/CHO-K1 Cells: CHO-K1细胞稳定表达人PD-L1和一个依赖抗原方式激活同源TCR的细胞表面蛋白
当两种细胞共培养时,PD-1/PD-L1相互作用会抑制TCR信号通路和NFAT-介导的萤光素酶活性。加入PD-1或PD-L1的抗体阻断PD-1/PD-L1抑制信号,会引起TCR信号和NFAT-介导的萤光素酶活性增加。
应用
优势
根据ICH指南预先验证的Bioassay
结果稳定
细胞学方法,体现MOA
操作简单,性能强劲
可用于960,384-孔板的高通量筛选研究
PD-1/PD-L1 Blockade Bioassay具有良好的准确性、精确性和线性
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