如果你跟全球大药厂的科研人员聊天说到CellTiter-Glo®细胞活力检测系统,他们总会亲切地称他为CTG。这个已经进入大药厂药物研发SOP多年的经典系统,一经推出,便用其超凡的性能征服了用户,并为药物研发的加速做出了不可忽视的贡献。CellTiter-Glo®细胞活力检测系统的魅力到底在哪里,今天就让小麦带你近距离接触一下这个传奇的检测系统。CTG我与你相见恨晚CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay 简称CTG, 是通过对 ATP 进行定量来测定培养物中活细胞数目的一种快速均质检测方法。ATP 是活细胞新陈代谢的关键指标。与传统的MTT比色法不同,这种基于高灵敏度生物发光方法的检测技术,不受化合物自发荧光的影响,创造了操作时间和检测灵敏度的新高峰。 CTG-强到爆的性能操作简单到一步加入,无需去除培养基等多步操作,避免了这些步骤带来的误差;加入试剂后孵育10分钟即可检测;最低可检测到15个细胞的灵敏度。 这是目前任何比色法都无法企及的指标。基于上述特点,这个技术可完美地与高通量操作兼容,也为高通量药筛带来了福音。 综上所述,曾被MTT法虐了多年的小麦不知道为什么有种被亮瞎眼,相!见!恨!晚!的感觉。 下面献上部分Cel...
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Eastep® RT Master Mix 和Eastep® qPCR Master Mix是Promega上海生产基地——上海普洛麦格生物产品有限公司生产的最新逆转录和qPCR产品。Eastep® RT Master Mix名称目录号规格反应次数目录价Eastep® RT Master Mix (5×)LS2050100μl50次(10μl反应体系)380LS2052400μl200次(10μl反应体系)1099Eastep® RT Master Mix (5×) (包含No-RT Control)LS2054400μl200次(10μl反应体系)1099Eastep® RT Master Mix 是用来合成cDNA第一链的优质反转录反应试剂。本产品为5x预混液,主要成份包含高效率逆转录酶M-MLV、MgCl2、dNTP、Oligo(dT)15 Primer、Random Primers、RNase inhibitor和反应缓冲液,只需添加模板RNA和水即可迅速地开始反应。本产品适用于合成Real Time PCR用短链目的片段cDNA模板,能够进行高性能的基因表达分析;同时也适用于高效合成全长的cDNA模板,对扩增2K左右的片段效率更高。产品中加入gDNA Remover能有效去除RNA模板中的gD...
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2017
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双报告基因经常被用于提高实验的准确性。“双报告”一词指的是在同一个实验体系内同时表达和检测两种不同的用作报告蛋白的酶。通常“实验组”报告基因反映的是某特定的实验条件所导致的效应,而共转染的“对照组”报告基因的活性则提供一个内对照,作为基线水平的反映,可将用于细胞活力或转染效率所引起的样品间差异减至最小。其他原因引起的误差,如加样体积的差异,细胞裂解效率和检测效率的差异等,均可被有效的降低。 Promega公司开发了Dual-Luciferase Reporter(DLRTM)检测试剂盒与Dual-DLRTM 检测试剂盒,实现了针对同一样品依次检测萤火虫荧光素酶和海肾萤光素酶。通过将实验体系中目的基因反应与无关因素的影响加以区分,DLRTM与Dual-DLRTM 检测试剂盒可提供快速而便利的检测方法,用来解释报告基因数据的生物学意义。Dual-Luciferase 检测系统特点:带有海肾萤光素酶作为内对照:与但报告基因相比较,结果更准确。方便的单孔检测模式:不需要将样品分成几份在进行报告基因的检测。快速:两种报告基因的检测均可在几秒钟之内完成。灵敏度高:可进行弱启动子、低表达/调控水平、低转染效率时蛋白表达的研究。线性范围宽:线性范围覆盖酶浓度的7个数量级,通常不需要对活性非常高的样品进行稀释。背景低:哺乳动物细胞中无内源性报告基因的表达。 Dual...
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2017
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HaloTag®蛋白标签技术是基于经过改造的催化活性缺失的细菌水解酶,蛋白大小为34kDa,在生理条件下能与氯化烷烃配基(HaloTag®配基)结合形成高度特异性不可逆的共价键。通过使用不同的配基可控制带有HaloTag®蛋白标签的待测蛋白的功能和应用。HaloTag®系统具有从细胞学实验到生化实验的广泛应用灵活性,无需转换融合蛋白标签或重新克隆。 Promega提供HaloTag®克隆载体及配基。HaloTag®载体包括多克隆位点载体和Flexi®克隆技术的载体。配基包括细胞渗透性和非渗透性荧光配基、生物素配基及反应性配基,反应性配基可用于建立自定义的HaloTag®连接结构。 HaloTag®配基(氯化烷烃+功能基团)荧光配基:用于细胞成像,蛋白相互作用检测(BRET)。具有不同颜色的荧光基团。非荧光配基:用于蛋白检测,如生物素Biotin,PEG-Biotin。表面配基:用于蛋白纯化,蛋白相互作用研究(Pull-down),磁珠,树脂,微阵列芯片。反应性配基:用于连接功能基团,如正电子成像术(PET)配基,磁共振试剂。技术优势最小化背景:HaloTag®蛋白标签与其他哺乳细胞蛋白没有同源性。不可逆的共价结合:HaloTa...
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